advancedbiomatrix Glycosil說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品描述

Glycosil ® 透明質(zhì)酸是HyStem ®和Hystem ® -C 水凝膠試劑盒的一種成分，可單獨(dú)購(gòu)買(mǎi)。Glycosil ® 是一種硫醇修飾的透明質(zhì)酸，是天然細(xì)胞外基質(zhì) (ECM) 的成分。Glycosil ®與 Gelin-S ® 或 ECM 蛋白（如層粘連蛋白、膠原蛋白或纖連蛋白）一起用于大多數(shù) 3-D 細(xì)胞培養(yǎng)和組織工程應(yīng)用。  

Glycosil ®（硫醇改性的透明質(zhì)酸鈉）包裝在 1 mL 或 5 mL 小瓶中，內(nèi)含 10 mg 或 50 mg 材料。小瓶被氮?dú)飧采w并在輕微真空下進(jìn)行細(xì)菌和內(nèi)毒素測(cè)試。 

產(chǎn)品描述

Gelin-S ® 是硫醇改性明膠（變性膠原蛋白），是 HyStem ® -C 和 HyStem-HP 水凝膠試劑盒的組成部分。大多數(shù)細(xì)胞在僅 Gelin-S 的水凝膠上不能很好地生長(zhǎng)。相反，Gelin-S 應(yīng)與 Glycosil ®  （硫醇修飾的透明質(zhì)酸）或 Heprasil ®  （硫醇修飾的透明質(zhì)酸和硫醇修飾的肝素）結(jié)合使用。重構(gòu)的 Gelin-S 在 15 至 37°C 時(shí)仍保持液態(tài)。

用于制造 Gelin-S 的明膠來(lái)自 A 型明膠，Bloom 250，源自豬皮。

Gelin-S®（硫醇改性明膠）包裝在 5.0 mL 小瓶中，每瓶含 50mg。小瓶被氮?dú)飧采w并處于輕微真空下。

將 Gelin-S 存放在未開(kāi)封的原始小瓶中，在 -20 °C 下最多保存一年。不要打開(kāi) Gelin-S 瓶蓋，因?yàn)樗鼈儠?huì)在氧氣存在下交聯(lián)。使用注射器和針頭將 DG 水添加到小瓶中。

注意：建議將每個(gè)小瓶全部重新配制。

使用指南

Gelin-S 是通過(guò)將凍干固體溶解在 DG 水（或任何無(wú)菌、脫氣、去離子水）中來(lái)制備的。重組后，它將在 1x 磷酸鹽緩沖鹽水 (PBS) 中，pH ~7.4。用于溶解的 DG 水的量取決于小瓶。

Gelin-S 應(yīng)按以下方式制備：

1. 讓 Gelin-S 小瓶達(dá)到室溫。

2. 在無(wú)菌條件下，使用注射器和針頭，將 1 mL 的 DG 水添加到“1 mL Gelin-S 小瓶"中，或?qū)?5 mL 的 DG 水添加到“5 mL Gelin-S 小瓶"中。

3. 將小瓶水平放置在搖桿或搖床上。固體*溶解需要 <40 分鐘。升溫至 37°C 或更低和/或輕輕渦旋將加快溶解時(shí)間。解決方案將是澄清和輕微粘稠的。

4. 即使添加了 Extralink ® ，Gelin-S 也不會(huì)形成水凝膠。要形成水凝膠，必須將其與 Extralink 和 Glycosil ®或 Heprasil ®混合。

產(chǎn)品描述

Heprasil ® 是硫醇修飾的透明質(zhì)酸和硫醇修飾的肝素，是 HyStem ® 水凝膠試劑盒的組成部分。透明質(zhì)酸是天然細(xì)胞外基質(zhì) (ECM) 的主要成分。肝素也以硫酸乙酰肝素的形式存在于 ECM 中。大多數(shù)細(xì)胞不會(huì)附著在僅 Heprasil 的水凝膠上。對(duì)于大多數(shù) 3-D 細(xì)胞培養(yǎng)和組織工程應(yīng)用， Heprasil 必須與 Gelin-S ® 或 ECM 蛋白（如層粘連蛋白、膠原蛋白或纖連蛋白）結(jié)合使用。

凝膠
化重組 Heprasil 在 15 至 37°C 時(shí)保持液態(tài)。在沒(méi)有交聯(lián)劑的情況下，Heprasil 將通過(guò)形成二硫鍵形成水凝膠；然而，凝膠化時(shí)間超過(guò)二十四小時(shí)。如果 Extralink ® 用于交聯(lián) Heprasil，膠凝時(shí)間約為 20 分鐘，無(wú)需低溫或低 pH 步驟。用磷酸鹽緩沖鹽水 (PBS) 或細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋 Heprasil 可以增加其膠凝時(shí)間。

產(chǎn)品描述

Extralink® Lite（PEGDA，聚乙二醇二丙烯酸酯）0.5 mL 小瓶含有 2.5 mg 二丙烯酸化 PEG，2.5 mL 小瓶含有 12.5 mg。小瓶被氮?dú)飧采w并處于輕微真空下。

Extralink ® 是分子量為 3500 Da 的聚乙烯二丙烯酸酯 (PEGDA)。它是一種硫醇反應(yīng)性交聯(lián)劑，可與 Glycosil ®、Heprasil ® 和 Gelin-S ® 中的硫醇基團(tuán)共價(jià)反應(yīng)形成粘彈性水凝膠。Extralink ® Lite 小瓶經(jīng)過(guò) >80% 的丙烯酸化處理，并作為 HyStem ® 水凝膠套件中的交聯(lián)組分提供。 

Gelation
Extralink ® Lite 用于化學(xué)交聯(lián) Glycosil。膠凝時(shí)間從短至 5 分鐘到長(zhǎng)達(dá)數(shù)小時(shí)不等，具體取決于使用的 Extralink 的量和 Glycosil 的濃度/稀釋度。

外鏈®對(duì)于不包含 Gelin-S 的應(yīng)用程序，使用 Lite 代替 Extralink。Glycosil 的較高相對(duì)濃度需要較少的交聯(lián)劑來(lái)模擬 HyStem-C 和 HyStem-HP 的膠凝時(shí)間和剛度。

貯存

Extralink： 在 -20°C 下將 Extralink 存放在未開(kāi)封的原始小瓶中長(zhǎng)達(dá)一年。重組的 Extralink 溶液可在 -20 °C 下儲(chǔ)存約一個(gè)月。

注意：建議將每個(gè)小瓶全部重新配制。

產(chǎn)品描述

PEGSSDA 使研究人員能夠以非酶的方式快速、溫和地溶解 HyStem® 水凝膠，從而輕松恢復(fù)生長(zhǎng)在水凝膠頂部或內(nèi)部的細(xì)胞或球體。PEGSSDA含有兩個(gè)內(nèi)部二硫鍵，用少量還原劑（如N-乙酰半胱氨酸或谷胱甘肽）迅速還原，導(dǎo)致凝膠液化。

PEGSSDA 是一種五嵌段 PEGDA 分子，由四個(gè) PEG 分子 (MW 2000 Da) 和兩個(gè)相互交叉的二硫鍵組成。只有外部 PEG 分子被丙烯酸化。最終分子量約為 8500 Da。與 PEGDA 一樣，PEGSSDA 是一種硫醇反應(yīng)性交聯(lián)劑，可與 Glycosil ®、HyStem、Heprasil ®和 Gelin-S ® 中的硫醇基團(tuán)發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成粘彈性水凝膠。PEGSSDA在水中凍干。

只需將 Extralink 或 Extralink-Lite 替換為 PEGSSDA 即可用于 HyStem 套件。

也可根據(jù)要求提供散裝非無(wú)菌 PEGSSDA。

貯存

在 -20°C 下將 PEGSSDA 存放在未開(kāi)封的原始小瓶中長(zhǎng)達(dá)一年。重組溶液可在 -20°C 下保存約 1 個(gè)月。

產(chǎn)品描述

聚乙二醇二丙烯酸酯 (PEGDA) 水凝膠是揭示基本細(xì)胞生物學(xué)的有力工具，因?yàn)樗鼈儽徽J(rèn)為是生物惰性的（“空白石板"），并且它們的機(jī)械性能可以在很大的模量范圍內(nèi)變化。

PEGDA 是一種新興的組織工程和再生醫(yī)學(xué)支架，因?yàn)榫酆峡梢栽谑覝叵驴焖侔l(fā)生，并且需要低能量輸入，具有高含水量，有彈性，并且可以定制以包含各種生物分子。

PEGDA 是一種交聯(lián)劑重復(fù)聚合物交聯(lián)劑，丙烯酸酯化程度 >80%。它可以在我們的 HyStem 系統(tǒng)中以低濃度用作硫醇反應(yīng)性交聯(lián)劑，或在自由基鏈光引發(fā)劑和光源存在的情況下用于制造僅 PEGDA 的水凝膠。僅 PEG 的凝膠通常不支持細(xì)胞附著，而無(wú)需結(jié)合細(xì)胞附著位點(diǎn)。

應(yīng)用
常規(guī)和 3-D 細(xì)胞培養(yǎng)
組織工程
光刻

在 -20°C 下將 PEGDA 存放在未開(kāi)封的原始小瓶中長(zhǎng)達(dá)一年。重組的 PEGDA 溶液可在 -20°C 下保存約 1 個(gè)月。

通過(guò)將凍干固體溶解在 DG 水中制備 PEGDA。PEGDA 水凝膠 (1 mL) 應(yīng)按以下方式制備：

1. 讓 PEGDA 達(dá)到室溫。

2. 在無(wú)菌條件下，將 1.0 mL DG 水添加到 100 mg PEGDA 小瓶中，制成 10% (w/v) 溶液。

3. 顛倒幾次以溶解。溶液將是透明的并略微粘稠。

4. 要消毒，請(qǐng)通過(guò) 0.2 微米過(guò)濾器過(guò)濾。

5. 將所需體積的光引發(fā)劑添加到 PEGDA。將小瓶放在搖桿或搖床上，讓固體*溶解（大約 10-20 分鐘）。

6. 保持溶液避光，直到準(zhǔn)備好交聯(lián)。將溶液移液到所需格式（即 96 孔板）和光交聯(lián)。

7. 水凝膠特性可能會(huì)因曝光時(shí)間和光的類(lèi)型而異。確保光交聯(lián)燈靠近水凝膠溶液。

8. 在 -20 °C 下冷凍未使用的 PEGDA 溶液并避光。

產(chǎn)品描述

Advanced BioMatrix 提供的細(xì)胞培養(yǎng)水經(jīng)過(guò)多個(gè)純化處理步驟，以確保質(zhì)量、一致性和可重復(fù)性。凈化后，水會(huì)進(jìn)一步處理以提取溶解氧，以盡量減少可能影響某些水凝膠溶解和聚合的 O 2 自由基的影響。該產(chǎn)品經(jīng)過(guò)無(wú)菌過(guò)濾和無(wú)菌和內(nèi)毒素測(cè)試。水以 10 或 20 mL 的體積包裝，瓶中的頂部空間最小，以隨著時(shí)間的推移保持其完整性和質(zhì)量。